BÀI 2. THỰC HÀNH TÁCH CHIẾT DNA

I. CHUẨN BỊ

• Dụng cụ: Cối sứ, chày sứ, vải lọc, dao nhỏ, cốc thuỷ tinh, đũa thuỷ tinh, ống nghiệm, giá đỡ ống nghiệm, pipette, que tre nhỏ.

• Hoá chất: Nước rửa bát, nước cất lạnh, cồn ethanol 70 % lạnh, dung dịch diphenylamine.

• Mẫu vật: Mô thực vật hoặc mô động vật, quả dứa còn xanh.

II. CÁCH TIẾN HÀNH

• Bước 1: Chuẩn bị mẫu vật gồm dịch chiết nước dứa và dịch chiết mô.

• Bước 2: Tách chiết DNA: Loại bỏ các thành phần không mong muốn để giải phóng DNA.

• Bước 3: Kết tủa DNA: Để thu nhận được DNA từ các tế bào của mô.

• Bước 4: Nhận biết DNA: Quan sát DNA hoặc nhận biết bằng thuốc thử. 

IV. THU HOẠCH

BÁO CÁO THỰC HÀNH

1. Mục đích thực hiện thí nghiệm.

Thực hành tách chiết được DNA từ các mẫu vật có sẵn.

2. Kết quả và giải thích

a, Kết quả tách chiết và nhận biết DNA: Thu được kết tủa DNA màu trắng.

b, Giải thích:

• Quá trình cắt nhỏ và giã nhuyễn mô có tác dụng phá vỡ tế bào.

• Cho nước rửa bát và dịch chiết nước dứa vào dịch chiết mô có tác dụng: 

• Các dung dịch tẩy rửa hoà tan lipid nhằm giải phóng dịch nhân tế bào vào dung dịch chiết xuất.

• Loại bỏ các protein bằng enzyme phân giải protein là protease (có trong nước ép dứa tươi).

• Ethanol lạnh có tác dụng: Kết tủa DNA.

• Khi lấy DNA bằng tăm tre cần khuấy thật nhẹ vì: DNA bị kết tủa rất dễ đứt gãy nên cần phải nhẹ tay.

3. Kết luận

• Tách chiết DNA là quy trình cơ bản trong nghiên cứu sinh học, cần phải thao tác cẩn thận và chặt chẽ.

• Cần lưu ý các điểm sau để thu được kết quả tốt hơn:

• Đeo bao tay và mặc đồ bảo hộ cẩn thận.

• Chọn lựa mẫu vật tốt.

• Nghiền kĩ mẫu.

• Lựa chọn dung dịch tách chiết phù hợp với loại mẫu và ứng dụng cụ thể.

• Tinh sạch DNA sau khi tách.

• Kiểm tra và đánh giá hiệu suất tách chiết.